https://doi.org/10.52973/rcfcv-e34457
Recibido: 23/05/2024 Aceptado: 31/07/2024 Publicado: 24/11/2024
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Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XXXIV, rcfcv-e34457
RESUMEN
La leche es uno de los alimentos básicos en la dieta de personas de
todas las edades; como cualquier otro alimento debe ser inocuo y no
presentar residuos de antibióticos por encima de los límites permitidos
por las legislaciones. El presente trabajo se llevó a cabo con el objetivo
de determinar la frecuencia de residuos de antibióticos en leche
cruda bovina, comercializada en tambos de las ciudades de Atyrá y
Caacupé, ambas del departamento de Cordillera, Paraguay, en el año
2022, mediante el método cualitativo de la prueba de difusión y test
de antibiótico MilkSafe™ 3BTC. Para el efecto, se tomaron muestras
de leche de catorce puntos de venta de la ciudad de Atyrá y trece
de la ciudad de Caacupé. Se realizaron 3 muestreos por punto en 3
periodos diferentes, totalizando 81 muestras de leche cruda bovina.
Los resultados obtenidos demostraron que, del total de muestras de
leche analizadas, el 81 % (66 muestras) dieron negativo a residuos de
antibióticos y el 19 % (15 muestras) resultaron positivas a residuos de
antibióticos. En cuanto a la frecuencia de residuos por ciudad, en Atyrá
de las 42 muestras recolectadas el 83 % (35) dieron negativo a la prueba
de residuos, mientras que el 17 % (7) resultaron positivas. En la ciudad de
Caacupé del total de 39 muestras, el 79 % (31) resultaron negativas y 21 %
(8) positivas. Se concluyó que la presencia de residuos de antibióticos
en leche cruda bovina es un hallazgo de marcada relevancia.
Palabras claves: Leche cruda; antibióticos; residuos
ABSTRACT
Milk is one of the basic foods in the diet of people of all ages; like any
other food, it should be safe and free of antibiotic residues above the
limits allowed by legislation. The present work was carried out with
the objective of determining the frequency of antibiotic residues
in raw bovine milk, marketed in dairy farms in the cities of Atyrá
and Caacupé, both in the department of Cordillera, Paraguay, in the
year 2022, using the qualitative method of the diffusion test and the
MilkSafe™ 3BTC antibiotic test. For this purpose, milk samples were
taken from 14 points of sale in the city of Atyrá and 13 in the city of
Caacupé. Three samples were taken per point in 3 different periods,
totaling 81 samples of raw bovine milk. The results obtained showed
that, of the total number of milk samples analyzed, 81 % (66 samples)
were negative for antibiotic residues and 19 % (15 samples) were
positive for antibiotic residues. Regarding the frequency of residues
by city, in Atyrá, of the 42) samples collected, 83 % (35) tested negative
for residues, while 17 % (7) were positive. In the city of Caacupé, of
the total of thirty–nine (39) samples, 79 % (31) were negative and 21 %
(8) were positive. It was concluded that the presence of antibiotic
residues in raw bovine milk is an important nding.
Key words: Raw milk; antibiotics; residues
Determinación de residuos de antibióticos en leche cruda bovina
comercializada en tambos del departamento de Cordillera, Paraguay
Nota técnica
Determination of antibiotic residues in raw bovine milk marketed in dairies of
the Department of Cordillera, Paraguay
Technical note
Marta Lara , Melina Alarcón , Fátima Ferreira , Luz Cardozo , Adriana González , Óscar Ortega , Luis Sosa , Mónica Báez*
Universidad Nacional de Asunción, Facultad de Ciencias Veterinarias, Catedra de Farmacología y Toxicología. San Lorenzo, Paraguay.
*Autor correspondencia: mbaez@vet.una.py
Residuos de antibióticos en leche cruda / Lara y col. _______________________________________________________________________________
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INTRODUCCIÓN
En Paraguay la industria láctea constituye uno de los eslabones
más importantes de la producción animal por sus implicancias en
la generación de empleo, la seguridad alimentaria y el arraigo del
productor rural a través de la generación de ingresos. El rubro se
encuentra mayoritariamente gerenciado por cooperativas y empresas
de capital privado, que se dedican a la producción de leche, queso,
manteca, yogur, helado, entre otros. Dichas empresas están situadas
principalmente en la Región Occidental (Chaco Central) y en el centro
y el sur de la Región Oriental del país [1].
En el aspecto nutricional, la leche de vaca está reconocida como
un alimento completo para el ser humano, formando parte de la
dieta de todas las edades durante, los últimos diez mil años. Por
su contenido en nutrientes y su excelente relación entre calidad
nutricional y aporte energético, se considera un alimento clave para
todas las etapas de la vida [2]. Al constituir un alimento de consumo
masivo, su calidad higiénica tiene una importancia maniesta, con
el n de cumplir la premisa que tanto la leche como los productos
lácteos sean inocuos e idóneos para los usos previstos. Para lograr
esta calidad, se deben aplicar buenas prácticas de higiene a lo
largo de toda la cadena láctea. La leche cruda de buena calidad no
debe contener residuos (antibióticos, plaguicidas, micotoxinas),
ni sedimentos (pelos, restos de piel, alimentos, insectos); debe
conservar sus características físicas y organolépticas; tener un
contenido de bacterias bajo (recuento de bacterias totales a 30ºC
de 200.000 UFC·cm
-3
); no debe contener sustancias químicas como
residuos de antibióticos y detergentes, así como presentar valores
normales de composición y acidez. La calidad de la leche cruda es
el factor determinante de la calidad de los productos lácteos [3].
Entre los problemas de salud globales, la resistencia a los
antimicrobianos (RAM) es el que mejor ilustra el enfoque “Una Salud”.
Dicho enfoque se define como un esfuerzo conjunto de varias
disciplinas que se unen para brindar soluciones a la salud humana,
animal y ambiental. La resistencia a los antimicrobianos está vinculada
a uno de estos tres componentes, debido al uso irresponsable y excesivo
de antimicrobianos en diversos sectores (agricultura, ganadería y
medicina humana) [4].
Con respecto a los residuos, el uso indiscriminado de antibióticos en
el hato lechero es un problema que afecta directamente la seguridad
alimentaria, debido a que, si las vacas tratadas continúan produciendo
indistintamente, la leche de las mismas contendrá agentes extraños
a su composición normal, en este caso antibióticos; por ende, la
ganadería no estará abasteciendo un producto inocuo [5].
La determinación de la presencia de residuos de antibióticos en
leche repercute directamente en dos aspectos muy importantes;
por un lado, en la salud pública, el riesgo que representa para las
personas el hecho de consumir residuos de medicamentos en la leche
que pueden ser nocivos para la salud del consumidor [6]; por otro
lado, los problemas tecnológicos y económicos debido a la inhibición
del crecimiento de bacterias fermentadoras necesarias para la
elaboración de productos lácteos, llegando a ocasionar pérdidas
económicas y de calidad a dichas industrias [5].
El objetivo del estudio fue determinar la frecuencia de residuos de
antibióticos en leche cruda bovina, comercializada en tambos de las
ciudades de Atyrá y Caacupé, ambas del departamento de Cordillera,
Paraguay, en el año 2022.
MATERIALES Y MÉTODOS
El estudio fue de tipo descriptivo y transversal realizado entre los
meses de marzo a diciembre del año 2022. La obtención de muestras
se practicó en tambos lecheros de la ciudad de Atyrá y Caacupé del
departamento de Cordillera. Este departamento cuenta con una
población estimada de 315.245 habitantes en el año 2021 [7]. La capital
departamental es Caacupé, donde también se desarrolla la mayor
actividad económica. Caacupé se encuentra ubicada a 52 km de la
capital, mientras que Atyrá a 61 km; la cercanía resulta ventajosa para
el dinamismo de la economía de las ciudades. Entre las actividades
económicas del departamento, la cría de ganado lechero y la producción
de leche representan el 5 % de ocupación de la población [7].
Recolección de muestras de leche
Al inicio del trabajo se procedió a identicar los puntos de venta
en ambas ciudades del departamento de Cordillera, tomando como
referencia los datos aportados por las unidades zonales del Servicio
Nacional de Calidad y Salud Animal (SENACSA), ente ocial del servicio
veterinario de la República del Paraguay.
Los puntos de venta de leche cruda bovina ya sea para
comercialización de subproductos, consumo inmediato o acopio
en tarros, fueron asentados en una planilla de datos.
Las muestras de leche bovina fueron proveídas por vendedores
de 14 puntos de venta de Atyrá y 13 de Caacupé. La obtención de las
muestras de leche se procedió en carácter de consumidor nal, en
botellas de plástico en un volumen de 500 mL por tarro; se realizaron
3 muestreos de los mismos puntos de venta con un intervalo de 15 días
entre muestreos con un total de 81 muestras; estas, posteriormente
fueron vertidas en frascos estériles con tapa de rosca. Por último,
dichos frascos fueron correctamente identificados mediante
rótulos y colocados en conservadoras portátiles para refrigerarlos
y trasladarlos al laboratorio para los análisis correspondientes.
Análisis de las muestras
Tan pronto las muestras fueron recibidas en el laboratorio del
Departamento de Microbiología e Inmunología de la FCV–UNA, fueron
sometidas al Test de antibiótico MilkSafe™ 3BTC, para detectar
residuos de antibióticos betalactámicos (con el grupo quimico ácido
6 – aminopenicilánico), incluidas la cefalexina, y tetraciclinas, en
leche. El test está basado en la técnica de inmunocromatograa de
oro coloidal. El oro coloidal presenta carga negativa en un ambiente
alcalino débil y puede formar fuertes enlaces electrostáticos con los
grupos de moléculas proteicas de carga positiva. Esta combinación
no afecta las propiedades biológicas de la proteína; la mayor carga
en la supercie de la nanopartícula de oro coloidal hace que tenga
una fuerte capacidad de adsorción a proteínas, y puede combinarse
con antibióticos en unión covalente de conjugados de polipeptídicos
formando proteína de oro coloidal. Con la ayuda de nanopartículas
de oro con alta densidad de electrones como marcadores, estas se
agregan al sitio de reacción del cuerpo del antígeno en el portador
de fase sólida, apareciendo manchas rosadas visibles; por lo tanto,
como marcador, el oro coloidal se emplea para la detección rápida
cualitativa o semicuantitativa de antígeno o anticuerpo en análisis
inmunocromatográco “in vitro” [8, 9].
En el caso de antibióticos, cuando el residuo en la muestra es
superior o igual al límite de detección, se combina con el anticuerpo
marcado, inhibiendo la combinación entre el antígeno recubierto de
TABLA I
Frecuencia de resultados positivos y negativos a residuos de antibióticos
en muestras de leche cruda, comercializada en tarros de puntos
de venta lechero en las ciudades de Atyrá y Caacupé, año 2022
Resultado del test Frecuencia absoluta Frecuencia relativa
Positivos 15 0,19
Negativos 66 0,81
TABLA II
Resultados del test de detección de residuos de antibióticos en muestras
de leche cruda, de las ciudades de Atyrá y Caacupé, año 2022
Ciudad Resultado del test Frecuencia Absoluta Frecuencia relativa
Caacupé
Positivos 8 0,21
Negativos 31 0,79
Atyrá
Positivos 7 0,17
Negativos 35 0,83
_____________________________________________________________________________Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XXXIV, rcfcv-e34457
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anticuerpo de oro coloidal en la línea del Test (T), haciendo que la línea
T sea más clara que la línea Control (C). Sin importar la presencia de
residuos de antibióticos en la muestra, la línea C es visible.
Para la realización de la prueba se utilizó el kit a una temperatura
ambiente (15–30°C). En cada tubo receptor se adicionó mediante una
pipeta 200 µL de leche, se colocaron las tiras del test y se llevó a la
incubadora marca “Advantec”, modelo CI–410 (Taiwán) durante 5 min
a una temperatura de (40 ± 2°C).
Posteriormente se realizó la lectura cualitativa, utilizando los
siguientes parámetros: Negativo: todas las líneas de test son más
fuertes que la línea de control; Positivo: cualquier línea de test es más
débil que la línea de control; Débil Positivo: cualquier línea de test es
igual a la línea de control; e Inválido: no hay línea de control presente.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En la TABLA I se observan los resultados globales de la detección de
residuos de antibióticos en dos ciudades del departamento de Cordillera.
Sandoval et al. [11] analizaron 100 muestras de leche cruda
comercializada en Paraguay en las ciudades de San Lorenzo,
Ñemby, Luque y Limpio, con el objetivo de determinar residuos de
betalactámicos, detectándose un valor de 3 % de positivos a dichos
antibióticos. Estos resultados son menores a los encontrados en este
estudio e indican la necesidad de realizar controles en diferentes
zonas geográcas a n de conocer la tendencia y realizar correcciones
en cuanto a buenas prácticas de uso racional de antibióticos.
Vásquez y Oliveira [12] evaluaron la frecuencia de presentación
de residuos betalactámicos en leche cruda en varias regiones
geográcas de Colombia, los factores de riesgo de su presentación,
y las más probables, por las que se entregó leche con residuos. Los
resultados encontrados, 0,05 % correspondiente 372.821 litros de
leche en un año, fueron menores a los hallados en este estudio. Estos
factores no dan respuesta a los resultados obtenidos en este estudio
que consistió en un diagnóstico rápido de inmunoensayo
Salas et al. [13], determinaron la frecuencia de residuos de
antibióticos en leche de vacas luego del periodo de descarte de
tres días, debido al tratamiento contra la mastitis con antibióticos
betalactámicos. Analizaron muestras de leche de 60 vacas mediante
la prueba inmunoenzimática SNAP (Betalactam). El 45,0 % (27/60)
resultó positivo a residuos de antibióticos; lo cual diere con el
porcentaje vericado en este trabajo de investigación.
Algunos factores que marcan la diferencia entre las dos últimas
investigaciones mencionadas [12, 13] y este trabajo son: uno, el hecho
de que en estos estudios se emplearon otras pruebas de detección
de antibióticos; dos, no se cuentan con otros datos referentes a
tratamientos realizados con anterioridad; y tres, otro aspecto
importante es la metodología de toma de muestras pues al muestrear
vaca por vaca las posibilidades de encontrar residuos aumentan,
sin embargo si el muestreo se realiza a través del tarro los residuos
presentes se someten a dilución.
En otra investigación realizada por Caracundo y Garnica [14] en
la cuenca de la provincia del Azuay – Ecuador, fueron analizadas 150
muestras utilizando el kit 2 in 1 Bet–Lactams + Tetracyclines test de
la marca Bioeasy®. En el mismo, se obtuvo el 22,8 % de presencia de
residuos de antibióticos betalactámicos incluidas tetraciclinas en las
muestras analizadas; dicho valor detectado se acerca al hallazgo de
esta investigación.
Además de la metodología de muestreo, otro punto importante
en el control de residuos de antibióticos en leche es la prueba de
detección. Vercelli et al. [15], expresan algunos aspectos ideales
para una prueba de detección entre ellos se citan; detección de gran
cantidad de moléculas en el mismo ensayo, buena relación costo
benecio, rápida y fácil de realizar. Con respecto a esto, algunas
limitantes encontradas en este estudio fueron: insuciente variedad
de marcas de test rápidos en el mercado. También la baja gama de
grupos de antibióticos que puede a detectar la prueba, pudiendo estar
presentes otros grupos de antibióticos. Fatemi et al. [16] realizaron una
revisión sistemática y metaanálisis de estudios realizados en Irán sobre
residuos de antibióticos en productos lácteos durante 2000–2022. Los
investigadores encontraron que, la prevalencia total de residuos de
antibióticos en los productos lácteos fue del 29 % (IC del 95 %: 15–43 %).
Entre los siete grupos de antimicrobianos evaluados, la mayoría de los
estudios se han realizado en los grupos de tetraciclina, betalactámico
y sulfonamida, con 16, 10 y 7 respectivamente, y el nivel más alto de
contaminación con 663 ± 1540 μg·L
-1
está relacionado con la tetraciclina.
Con respecto al tipo de antibiótico encontrado en las muestras
positivas; de las 15 muestras, 12 de ellas correspondieron a
betalactámicos en general y 3 reaccionaron a betalactámicos y
cefalexinas, no se encontraron muestras con residuos de tetraciclinas.
En la TABLA II, se aprecian los resultados del test de detección
de residuos de antibióticos en las ciudades de Atyrá y Caacupé
expresados en términos de frecuencia absoluta y frecuencia relativa.
El porcentaje de muestras positivas encontradas en este estudio
correspondiente a un 19 %, podrían deberse al uso inadecuado de
antibióticos en las vacas con nes terapéuticos o prolácticos [10],
la falta de cumplimiento de los periodos de retirada del fármaco
considerando los antibióticos rastreados y las indicaciones del
laboratorio, mala práctica del tratamiento de secado [10].
Residuos de antibióticos en leche cruda / Lara y col. _______________________________________________________________________________
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CONCLUSIONES
Del total de muestras analizadas 19 % resultaron positivas a residuos
de antibióticos. Debido a que la leche bovina es considerada un
producto básico en la canasta familiar, y más en las zonas rurales,
se recomienda seguir monitoreando la presencia de residuos así
como la implementación de planes sanitarios preventivos para
evitar la presencia de antibióticos y preservar la inocuidad de la
leche consumida en las ciudades de Atyrá y Caacupé, a través de una
correcta capacitación del personal dentro del proceso productivo,
un manejo adecuado de los medicamentos en los tambos y una
sensibilización de los productores sobre los riesgos para la salud
de las personas del consumo de productos lácteos con residuos de
antibióticos.
Asimismo, es de suma relevancia promocionar y fortalecer el
enfoque de “Una salud”, a n de lograr avances signicativos en la
lucha contra la resistencia antimicrobiana.
Conicto de interés
Los autores conrman que no existen conictos de intereses en
el presente trabajo
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